תוֹכֶן
מיקרוביולוגים חוקרים את המאפיינים של מיקרואורגניזמים, כגון אצות, חיידקים, פרוטוזואה, פטריות ווירוסים, תוך שימוש במיקרוסקופ. למרות כמה אורגניזמים, כגון פרוטוזואה ותאי שמרים קל לראות דרך שקופיות, תאים חיידקיים דורשים מכתים. מדענים פיתחו מספר שיטות, כגון טכניקת גראם מכתים, מכתים חומצה מהירה מכתים ניאון כדי לשפר הדמיה של תאים חיידקיים ומבנים תאים. באמצעות שיטות מכתים כאלה, ניתן לזהות את המאפיינים המבניים המסייעים לסווג את החיידקים.
הטכניקה מכתים מסייע לשפר את הדמיה של החיידקים (דאנקן סמית '/ Stockbyte / Getty Images)
הדמיה טובה יותר
האורגניזמים החיידקיים כל כך קטנים, שרובם נראים רק תחת מיקרוסקופ עם כוח ההגדלה של 1000 פעמים. עם זאת, הגדלה פשוטה אינה מספקת מידה מספקת של בהירות, ולכן חיידקים ולכן צריך להיות בצבע לפני תצפית כדי לספק את הבהירות הנדרשת להדמיה.
זיהוי וסיווג
מכתים של חיידקים להבחין בין סוגי החיידקים נקרא מכתים דיפרנציאלי. מכתים גרם הוא מכתים דיפרנציאלי המבדיל חיידקים כפונקציה של תוכן הקיר התא. בשיטה זו, תאים חיידקיים להגיב עם צבע סגול קריסטל להפוך סגול. על ידי הוספת סוכן דהוי כמה תאים חיידקים לאבד צבע, בעוד שאחרים לא. על ידי הוספת צבע safranin, תאים דהוי לרכוש מכתים אדום, בעוד תאים חיידקיים שלא לאבד צבע להישאר סגול. תאים אדומים נקראים אורגניזמים של גראם ואלה שאינם הופכים לאדומים מסווגים כאורגניזמים חיוביים של גראם. הטכניקה גראם מכתים מספק שיטה מהירה לזיהוי ראשוני של חיידקים המעורבים זיהומים. כמו כן, תהליך עמיד מכתים חומצה מסייעת במיוחד לזהות אורגניזמים השייכים למעמד של חיידקים הנקראים mycobacteria, כגון Mycobacterium שחפת.
גילוי היתכנות
בדגימות התרבות החיידקית, לעתים קרובות חשוב לזהות נוכחות של תאים חיידקיים חיים. שיטות כגון מכתים פלואורסצנטי לעזור לזהות אם תאים תרבות הם קיימא או לא. חיידקים חיים יש את היכולת להמיר את כלוריד tetrazolium 5-cyano-2,3-ditolyl (CTC) לתוך צבע המציג אדום הקרינה. לכן, כאשר תרבויות צבע CTC פולטים אלה הקרינה, זה מצביע על נוכחות של חיידקים קיימא. Propidium iodide הוא מכתים שפועל רק על תאים שאינם חיים שיש להם פגמים ממברנות ולכן שימושי בזיהוי תאים חיידקיים מתים.
זיהוי מבנים סלולריים
צביעה מספקת שיטת ויזואליזציה ברורה עבור מבנים תא שונים. לדוגמה, שיטת מכתים Feulgen מאפשר זיהוי של הגרעין בתוך תאים חיידקיים, בעוד מכתים אלברט שימושי להדמיה של גרגרי מטאכרומטית. כמו כן, טכניקת הספגה כסף מאפשר זיהוי של spirochetes. Flagella קל לראות כאשר הם בצבע עם צביעה של ריו. מכתים ירוקים מלכיט מסייע לזהות נבגים חיידקי.