תוֹכֶן
אלכוהול קר משמש להפריד בין דנ"א לבין פתרונות מבוססי מים, ומאפשר לו להיות מטוהרים לבדיקות גנטיות עוקבות. הוספת אלכוהול לפתרון המכיל DNA הוא דרך פשוטה לעשות את זה טהור בטמפרטורות נמוכות יותר להאט את האנזימים כי לבזות אותו, נותן תוצאות החילוץ טוב יותר.
שבירת קירות סלולריים -
ההליכים מיצוי להשגת DNA טהור צריך להיפטר מכל המרכיבים המולקולריים והכימיים של הרקמה שממנו DNA מופק. הצעדים הראשונים כרוך הרס של קירות התא. זה יכול להיעשות עם חומרים כימיים שונים כי הם קאוסטית כדי ממברנות התא אבל לא לפגוע DNA. התאים עשויים להיות גם sonicated, homogenized או הסתובבו להרוס את הקרומים.
הסרת שומנים
לאחר קירות התא נהרסים, דטרגנט נוסף כדי להיפטר שומנים ושמנים המרכיבות את קרום התא. דטרגנטים לגרום פירוק של שמנים ושומנים בפתרון.
הסרת חלבונים
חלבונים ואנזימים ניתן לעכל על ידי הוספת פרוטאז לפתרון. פרוטאזות לשבור חלבונים לתוך פפטידים קטנים וחומצות אמינו.
דגימת דנ"א
תוספת של אלכוהול קר כקרח לפתרון תזרז ותצבור את ה- DNA. החומר הגנטי ניתן לאסוף על ידי צנטריפוגה המדגם decanting את השכבה הנוזלית. זה צריך להתקיים משקע קטן בתחתית צינור צנטריפוגות.
טיהור DNA
ה- DNA יכול להישטף על ידי השעיית מחדש פתרון אלכוהול קר מחדש centrifuged כמה פעמים כדי לקבל מדגם טהור מאוד. אלכוהולים אופייניים המשמשים אתנול ואיזופרונול. תהליך זה משאיר מדגם טהור מאוד בבדיקות קפדניות.
