תוֹכֶן
מיקרוביולוגים חוקרים את המאפיינים של מיקרואורגניזמים, כגון אצות, חיידקים, פרוטוזואה, פטריות ווירוסים, באמצעות מיקרוסקופ. אף על פי שחלק מהאורגניזמים, כמו פרוטוזואה ותאי שמרים קל לראות דרך השקופיות, תאי חיידקים דורשים מכתים. מדענים פיתחו מספר שיטות, כגון טכניקת הצביעת גרם, צביעה עמידה בחומצה והכתמת פלואורסצנט לשיפור ההדמיה של תאי חיידקים ומבני תאים. באמצעות שיטות צביעה כאלה ניתן לזהות את המאפיינים המבניים המסייעים לסווג חיידקים.
צפייה טובה יותר
אורגניזמים בקטריאליים כל כך קטנים שרובם נראים רק תחת המיקרוסקופ עם עוצמת הגדלה של פי 1000. עם זאת, הגידול הפשוט בגודלו אינו מספק מידת מספיק של בהירות, ולכן יש לצבוע את החיידקים לפני התצפית בכדי לספק את הבהירות הדרושה להדמיה.
זיהוי וסיווג
צביעת חיידקים להבחנה בין סוגי חיידקים מכונה צביעת דיפרנציאל. כתם גרם הוא כתם דיפרנציאלי המבדיל חיידקים בהתאם לתכולת דופן התא. בשיטה זו, תאי החיידק מגיבים בצבע סגול קריסטל כדי להפוך לסגול. באמצעות תוספת של חומר הלבנה, תאי חיידקים מסוימים מאבדים את צבעם, ואילו אחרים לא. באמצעות תוספת צבע ספרנין, תאים דהויים הופכים לאדומים, בעוד שתאי חיידקים שאינם מאבדים צבע נשארים סגולים. תאים שהופכים לאדומים נקראים אורגניזמים שליליים של גרם ותאים שאינם הופכים לאדומים מסווגים כאורגניזמים חיוביים גרם. טכניקת הצביעת גרם מספקת שיטה מהירה לזיהוי ראשוני של חיידקים המעורבים בזיהומים. כמו כן, תהליך הצביעה העמיד בפני חומצה מסייע בזיהוי ספציפי של אורגניזמים השייכים לסוג החיידקים הנקראים מיקובקטריה, כגון Mycobacterium tuberculosis.
איתור היתכנות
בדגימות של תרביות חיידקים, לעיתים קרובות חשוב לגלות נוכחות של תאי חיידק חיים. שיטות כגון מכתים פלואורסצנטי עוזרות לזהות אם תאי גידול הם קיימא או לא. לחיידקים חיים יש יכולת להמיר טטרזוליום 5-ציאנו-2,3-דיטוליל כלוריד (CTC) לצבע המראה פלואורסצנטי אדום. לכן, כאשר תרבויות בצבע CTC פולטים קרינה פלואורסצנטית אלה, זה מציין נוכחות של חיידקים קיימא. פרופידיום יודיד הוא כתם שפועל רק על תאים שאינם חיים שפגעו בקרומים ולכן הוא שימושי בזיהוי תאי חיידק מתים.
זיהוי מבנים תאיים
מכתים מספק שיטה להדמיה ברורה של מבני תאים שונים. לדוגמא, שיטת הצביעה בפולגן מאפשרת זיהוי של הגרעין בתוך תאי חיידקים, בעוד שצביעת אלברט שימושית בהדמיית גרגירים מטכרומטיים. כמו כן, טכניקת ההספגה הכסופה מאפשרת זיהוי של ספירוכטים. קל לצפות בפלאגלה כאשר הם צבעוניים בצביעה של ריו. צביעת ירוק מלאכיט מסייעת בזיהוי נבגי חיידקים.
